75歲老年人梅毒陽性之謎
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劉小柳 深圳市羅湖人民醫院檢驗科
【案例經過】
「鈴鈴鈴………」,呼吸內科醫生辦公室打來電話,疑問212床的75歲的老奶奶的梅毒結果,問是否標本弄錯了,病人以及家屬都極大意見懷疑梅毒陽性的結果。
電話還沒有講完,家屬直接來到檢驗科說,我媽是老實人,是臉朝黃土背朝天的老實農民,生活樸素謹慎一輩子,是由於得了心血管疾病才做全身檢查,怎麼也不可能會查出梅毒陽性吧,這不是給我老媽增添了心理負擔嗎?家屬很生氣的質問。
【分析與心得】
面對醫生和家屬如此疑惑的態度,我們重新叫病人次日重抽空腹靜脈血,且血樣的運送和保存都嚴格按照標準操作規程進行,檢查項目除了梅毒抗體、增加了愛滋病抗體、C型肝炎抗體、B型肝炎五項標誌物,最終結果還是如上述檢查的梅毒陽性結果,且檢測試劑和實驗操作都是在質控內,到底問題出現在哪裡?且聽我一一指明。
梅毒的病原體是梅毒螺旋體即蒼白螺旋體的蒼白亞種,是一種性傳播疾病,由梅毒螺旋體通過破損的皮膚與黏膜由感染者傳染給患者,可侵犯皮膚、黏膜、心臟血管系統、神經系統等多種組織器官,產生各種複雜的臨床症狀和體徵,嚴重影響人們的身心健康。
當人體感染梅毒後,體內會產生兩類抗體,一類是直接針對梅毒螺旋體抗原的特異性抗體,另一類是針對類脂質抗原的非特異抗體,此類抗體無特異性,並非是感染梅毒才有此抗體,當老年人患有另外一些疾病以及生理狀況改變時,體內可能產生低度相對較低的抗類脂質的抗體,凡是能導致產生類脂質抗體的疾病,均可以使梅毒抗體陽性。
臨床上診斷梅毒時,主要根據臨床症狀和血清學檢查,甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)和快速血漿反應素環狀卡片試驗(RPR)作為梅毒常規篩查,對特異性抗體的檢測是梅毒螺旋體酶聯免疫吸附試驗(TP-ELISA)和梅毒螺旋體被動顆粒凝聚試驗(TPPA),TP-ELISA對其IgG和IgM都具有很好的檢測能力,靈敏度高,且價格低廉,操作簡單,結果客觀,在國內被廣泛使用,而只有FTA-ABS和TPPA是被美國疾控預防中心規定為確診方法。
國內很多文章顯示TP-ELISA的特異性報導不一致,尤其是在無發病史和無疾病接觸史的老年人TP-ELISA顯示陽性,且TPPA法採用的是純化的致病性的梅毒螺旋體抗原,TP-ELISA法選用的是抗原分子有47KD、45KD、17KD、15KD蛋白,這4種蛋白為梅毒螺旋體外膜的脂蛋白,具有較好的免疫活性,並且用基因重租表達和BOC-氨基固相法得到多肽抗原,再與人血清白蛋白聯接,直接作為試劑抗原使用,老年人容易出現免疫功能上的異常,容易產生一些針對聯接用的白蛋白抗體或者一些異常蛋白質干擾TP-ELISA反應,造成老年人梅毒假陽性,且美國疾病預防控制中心在研究報告中明確了梅毒血清特異性抗體檢測法FTA-ABS和TPPA,未提及ELISA法,用TP-ELISA容易有假陽性。
加上老年人由於年齡的變化,惡性腫瘤、呼吸道感染、肺炎、糖尿病、類風濕性關節炎和系統性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病的纏擾,這些疾病會使老年人機體內釋放誘導某些治療性的抗體、噬異性抗體、自身抗糖尿病病體和抗類脂質抗體,甚至體內可能有其他螺旋體共生,誘導產生抗屬、群或科特異抗原的交叉反應抗體,它們會在TP-ELISA反應過程中具有一定的吸附作用,從而是免疫抗原抗體顯色反應出現假陽性的結果。
而且在檢查梅毒血清學反應出現的假陽性結果統計有三種:第一種是技術性假陽性,即血樣標本已經被污染或者溶血、離心處理不徹底、細菌污染標本、檢測儀器、方法學和實驗室操作不規範造成,當然,這些可以在實際操作過程中進行重複實驗就可以排除;第二種是在老年人本身的生理機制改變會使體內產生各種類脂質抗體,使檢測結果成陽性,所以老年人的梅毒血清學試驗陽性不可以判斷此老人正在感染或者以往絕對感染過梅毒,因為檢測到的或許是類脂質抗體而非螺旋體抗體;第三種是商品試劑盒問題,這種影響結果相對較小,除FTA-ABS本身配有吸收劑外,其他的金標記多疫層析、TP-ELISA等均未配置吸收稀釋劑,所檢測血清均未用吸收劑吸除能與梅毒螺旋體抗原產生交叉反應的非致病性密螺旋體抗體,從而使檢測結果出現假陽性。
檢查梅毒血清學反應結果不僅會出現假陽性,也會有假陰性的結果,假陰性結果統計有三種:第一種是技術性假陰性,檢驗人員對實驗條件模糊,沒有按照標準操作規程加入抗原量,擅做主張改變試劑量,使實驗的靈敏度降低以致抗體滴度下降出現假陰性;第二種是實驗方法學本身因素,在早期梅毒患者血清中的心磷脂抗體(血清中反應素)含量過低無法檢測而出現假陰性,有些則是含量過高超出檢測範圍出現假陰性;第三種是抗生素的使用,部分患者在早期已經就診,提前應用抗生素,抗生素使用會降低血清中反應素的產生。
梅毒血清學試驗假陽性和假陰性的結果都會誤導醫生的診治,回到上述患者的血漿反應素環狀卡片試驗(RPR)法,它本身為非梅毒螺旋體抗原試驗, 75歲的大媽本身就是患有類風濕性關節炎,受自身免疫性疾病的影響,體內產生其他螺旋體共生,它們會在RPR反應過程中具有一定的吸附作用,從而是免疫抗原抗體顯色反應出現假陽性的結果。
【經典箴言】
梅毒血清學檢查是診斷梅毒的重要依據,但不是唯一,除檢驗結果還應了解患者的生活史和既往病史,對結果陽性的標本能很準確的發送至臨床,作為檢驗人員應該在不斷學好檢驗專業知識基礎上,更進一步的去學習相關臨床專業知識,才能對患者及家屬做好合理的解釋。
【參考文獻】
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