二期梅毒患者TRUST檢測中的前帶現象

檢驗醫學——中華檢驗醫學網旗下微信公眾平台。

您的隨身微雜誌。

樊華 齊齊哈爾市第一醫院檢驗科

一度在人們視線中消失的梅毒在近些年裡，其發病率一直是呈逐年增加的趨勢^[1]，它是由蒼白螺旋體（TP）感染引起的一種經典性傳播疾病，是我國主要的性傳播疾病之一。

梅毒的症狀和體徵都很複雜，而且其臨床表現也是時顯時隱，病程冗長。

目前，梅毒感染的臨床表現及血清學試驗仍是梅毒診斷及評價治療療效的主要手段。

眾所周知，前帶現象是梅毒血清學試驗中，不可避免的一個問題，主要是發生在非梅毒螺旋體血清試驗中^[2]。

2016年8月11日在我科免疫室檢出的一例TRUST陰性，ELISA實驗呈陽性標本，因該患者臨床表現出典型的梅毒二期玫瑰糠疹，臨床醫生高度懷疑該患者的TRUST檢測有前帶現象發生，本科室人員故對該血清標本做了進一步分析，情況報告如下。

1．資料與方法

1.1 標本來源 血清標本來自一名就診女患，年齡56歲，因皮膚出現玫瑰糠疹而到我院臨床皮膚科門診就診。

1.2 試劑及儀器 梅毒ELISA試劑盒（英科新創廈門科技有限公司，批號2015117527）；梅毒膠體金試劑盒（英科新創廈門科技有限公司，批號2016030923）；甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）試劑盒(上海榮盛股份有限公司,批號20151213204）；梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒（TPPA凝集法）（日本富士瑞必歐株式會社）。

所有試劑均在效期內使用。

儀器為ELISA全自動酶免儀（瑞士TECAN)，全程實驗嚴格按照說明書操作。

1.3 分析方法及結果

TRUST試驗將待檢血清用無菌生理鹽水做倍比稀釋，然後按照試劑說明書進行操作，重複2次試驗，結果均為原倍陰性，1:2開始出現微小凝集，1:64陽性，1:128陰性。

ELISA試驗以原倍血清，再用無菌生理鹽水按1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256、1:512、1:1024、1:2048製備連續稀釋度的血清。

嚴格以試劑說明書進行雙孔平行雙波長（450nm/630nm）OD值的測定，計算出平均OD值及S/C.O.值；試驗檢測發現，該原倍血清S/C.O.值為9.92，1:16稀釋血清S/C.O.值為12.138，為稀釋系列S/C.O.值最高，見表1。

表1 血清稀釋系列平均OD值及S/C.O.值（C.O.值：0.2016）

梅毒螺旋體抗體檢測（凝集法TPPA）：按照試劑說明書倍比稀釋檢測，結果為未致敏顆粒1:40陰性，致敏粒子1:80陽性。

2．討論

在非特異性梅毒螺旋體抗原試驗（如TRUST、PRP等）中，出現不典型、陰性或者弱陽性結果，而將該血清稀釋時候重複試驗是，卻出現了陽性結果，這就是我們常說的前帶現象。

該現象出現的原因，主要是由於患者的血清中抗心磷脂抗體量過多，使得抗原相對不足，從而抑制陽性反應。

將血清進行倍比稀釋後再行檢測，當抗原抗體比例適當時，即可呈現明顯凝集顆粒。

在本病例中，血清檢測最初報告結果是TP-ELISA陽性，TRUST陰性。

因患者出現了典型的二期梅毒病症—玫瑰糠疹，結合病史，皮膚科門診醫生首先提議複查，進而我們檢驗人員用倍比稀釋法，重新進行了TRUST檢測，確認其陽性結果。

但對於其他專業的臨床科室同仁，在遇到類似這樣情況，其實是很容易出現漏診。

所以，在為患者診療過程中，臨床各科室也要互通有無，及時請皮膚科醫生會診，以免漏診延誤病情。

在本研究中，同時還用稀釋系列血清進行了TP-ELISA檢測，1:16稀釋血清S/C.O.值為12.138，為稀釋系列S/C.O.最高值。

在既往的的TP-ELISA試劑多是雙抗原夾心法中的一步法，更易發生前帶現象。

本實驗室中TP-ELISA試劑盒非一步法，從表1結果可以看到，如果抗體效價過高，仍在一定程度上會有的HOOK效應（即前帶現象）。

目前，前帶現象仍是實際檢驗工作中無法避免的問題。

在筆者所在的免疫組，對於梅毒檢測主要有ELISA、TRUST和TPPA等方法。

常規TP檢測應用ELISA法，對於陽性結果且小於50歲，結合膠體金法檢測結果，如果也為陽性，出具陽性報告；如果為陰性，要用TPPA進行確認。

因為老年人的特異與非特異梅毒血清學檢查的假陽性率較正常人群高，已有研究發現51歲以上老年人梅毒陽性率非常高，占梅毒陽性的67.54%^[3]，即對於TP-ELISA陽性且年齡大於50歲患者，無論膠體金法檢測結果如何，均要進行TPPA確認，排除假陽性。

通過本病例研究，首先我們檢驗人員應重視前帶現象，注重理論與實踐結合學習，提高前帶現象的檢出率及應對干預；同時，對於TRUST檢測，血清稀釋倍數應足夠，有報導常要稀釋到1:64才有陽性結果^[4]，此點值得注意。

此外在實際臨床工作中，檢驗科工作人員要加強與臨床醫生的積極溝通，彼此之間建立有效合作機制，這樣才能防止梅毒患者誤診漏診，將準確結果提供給臨床醫生。

參考文獻

[1] 李梅,張菊梅.TPPA在梅毒血清學試驗中的臨床應用價值[J].甘肅醫藥.2011,30(1):43-5.

[2] 趙辨.臨床皮膚病學[M].南京:江蘇科學技術出版社.2001:523.

[3] 董桂香.老年人梅毒陽性的分析[J].中國實用醫藥.2010,5(2):118.

[4] 林榕.梅毒患者前帶現象56例檢測分析[J].中國社區醫師.2015,31(25):116-8.

備註：該患者兩周後再次進行TRUST複查，因已對該患者備案，採集血清樣本直接進行倍比稀釋後檢測。

檢驗醫學•中華檢驗醫學網

全國最具影響力的檢驗醫學新媒體平台