診斷肺結核,有了「它」就萬能了?

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T-SPOT.TB 檢測能利用結核特異抗原ESAT-6及CFP-10檢測出受試者體內存在的結核效應T淋巴細胞,從而判斷該受試者是否感染結核桿菌(現症感染)。

那麼,檢測結核桿菌,它真的是萬能的嗎?

作者:南方醫科大學珠江醫院 單雄威

來源:醫學界呼吸頻道

近年來我國結核病發病呈現不典型和多重耐藥的特點。

T-SPOT.TB因其檢測快速、敏感性和特異性高廣泛應用於臨床結核病的診治過程中。

那麼,是否在結核病的診斷過程中,T-SPOT.TB是萬能的呢?

什麼是T-SPOT.TB?

結核感染特異性T細胞實驗(T cell spot test of tuberculosis infection, T-SPOT.TB)是利用酶聯免疫斑點法檢測結核感染者體內的特異性效應T淋巴細胞來診斷結核病的一種新的實驗技術。

結核感染特異性T細胞實驗的臨床應用領域

T-SPOT.TB是如何檢測到結核菌的?

1996年Mahairas等研究發現在致病性結核分枝桿菌中存在一段特殊的基因序列,即「RD1」基因序列,該基因序列在所有卡介苗菌株和大部分非結核分枝桿菌中表達缺失。

RD1基因序列編碼兩種蛋白:早期分泌抗原靶6KD(ESAT-6)和培養濾液蛋白10KD(CFP-10)。

人體感染結核分枝桿菌後,這兩種蛋白作為抗原能夠刺激機體細胞免疫,產生特異性效應T淋巴細胞,這種細胞具有「記憶功能」,當再次受到結核分枝桿菌刺激時會釋放特異性細胞因子γ-干擾素(IFN-γ)。

基於此原理,英國學者Lalvani採用酶聯免疫斑點實驗技術(ELISPOT)以結核特異性抗原ESAT-6和CFP-10肽段庫作為刺激原,檢測外周血單個核細胞(PBMC)IFN-γ的分泌,並經酶聯免疫顯色,通過ELISPOT分析系統對斑點數進行分析檢測結核分枝桿菌,即T-SPOT.TB。

T-SPOT.TB實驗結果判定標準是什麼?

T-SPOT.TB結果陽性是否就能確診結核菌感染?

不能,陽性結果表明患者體內存在結核特異性T淋巴細胞,提示患者存在結核菌感染。

若出現以下情況將不能排除假陽性結果可能。

①堪薩斯、蘇式、戈登或海分枝桿菌感染可出現假陽性結果(註:這些分枝桿菌可使HIV患者發生機會感染)。

②結核菌素實驗(TST)亦能造成假陽性結果,故需在TST實驗前或試驗後3天內抽取血標本。

此外,陰性結果不能完全排除暴露或感染結核菌的可能性,僅表明患者體內未檢測到結核特異性T淋巴細胞,若出現以下情況,將不能排除結核菌感染可能。

①因感染階段不同(如檢測標本在細胞免疫發生之前取得)引起的假陰性結果;

②患者存在免疫系統功能不全的情況,如HIV感染者、腫瘤患者及嬰幼兒等;

③其它免疫學、實驗非正常操作的差異。

總結:

1)研究顯示T-SPOT.TB在診斷結核感染方面具有診斷快速、較高的敏感性和特異性,但T-SPOT.TB陽性結果不能作為結核病單獨或決定性診斷依據,且無法鑑別潛伏感染和活動性結核病。

此外,陰性結果不能完全排除暴露或感染結核菌的可能性,且這種檢測的費用較高。

T-SPOT.TB不能取代痰塗片在確證結核病的方面的重要作用。

2)T-SPOT.TB技術可以檢測靜脈血、痰液、支氣管肺泡灌洗液、胸腹水和腦脊液等,對肺結核及肺外結核診斷有一定的診斷價值。

同時對結核患者抗結核治療的療效評估具一定的臨床意義。

參考文獻:

[1]陳灝珠,林果為,王吉耀,何禮賢,等. 《實用內科學》: 第14版[M]. 人民衛生出版社,2013.

[2]Lalvani A. Spotting latent infection:the path to better tuberculosis control[J].Thorax,2003,58:916-918.

[3]Cho OH, Park KH, Park SJ,et al. Rapid diagnosis of tuberculous peritonitis by T cell-based assays on peripheral blood and peritoneal fluid mononuclear cells[J].J Infect,2011,62(6):462-471..

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