病原學檢測、PCR、T-SPOT：從發展的角度看結核檢驗

檢驗醫學

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吳曉霞

湖南醫藥學院第一附屬醫院檢驗科

結核病是由結核分枝桿菌引起的慢性感染性疾病，可累及全身各個器官。

我國是結核病高負擔國家，結核的檢驗及確診對其防治及其重要。

本文將從發展的角度介紹臨床常用的結核傳統檢驗技術和新興檢驗技術。

1.塗片檢查

抗酸染色檢查能快速檢測陽性菌，且操作簡便易於開展。

但敏感性較差，陰性結果不能排除結核感染，且不能鑑別分支桿菌的種與屬，易出現非致病性分支桿菌污染引起的假陽性。

目前，初診肺結核患者，直接痰塗片鏡檢2次痰菌陽性可確診。

2.細菌培養

相比塗片檢查，細菌培養的陽性率及敏感性都有增加，然而，結核菌生長緩慢，常需3-5周才能長成肉眼可見的菌落，不易在臨床開展。

儘管塗片檢測和細菌培養的敏感性並不高，但病原學檢測仍是結核診斷的金標準。

3.結核抗體檢測

結核菌抗原性較弱，且與其他分支桿菌具有較強的交叉免疫，其血清抗體檢測的靈敏度和特異性均較低。

因不能區分是結核感染還是卡介苗接種所致陽性，因此成人陽性結果不能確診感染。

成人陰性反應一般可視為未被結核菌感染，但仍需考慮因結核感染早期及患者免疫力低下不能產生足夠的抗體等情況所致的假陰性。

4.PCR

近年來，隨著分子生物學的發展，利用PCR技術檢測結核DNA已逐漸應用於臨床，其敏感性可達98％～100％，但遺憾的是該方法特異性較差，易出現假陽性，常只作為臨床輔助診斷。

5.結核菌素試驗(PPD實驗)

是基於Ⅳ型變態反應原理的一種皮膚試驗。

該試驗以72小時為觀察反應時間，48-96小時內皆可測量反應。

結素試驗陰性反應除提示未感染結核菌外，還可見於以下情況：①結核菌感染後需4－8周有變態反應充分建立；在這變態反應前期，結素試驗可為陰性。

②在應用糖皮質激素等免疫抑制劑者，或營養不良及麻疹、百日咳等病人，結素反應也可暫時消失。

③嚴重結核病和各種危重病人對結素無反應，或僅為弱陽性，這都是由於人體免疫力連同變態反應暫時受到抑制的結果；待病情好轉，又會轉為陽性反應。

④淋巴細胞免疫系統缺陷（如淋巴瘤、白血病、結節病、愛滋病等）病人和老年人的結素反應也常為陰性。

結素試驗陽性表示接種過卡介苗或感染結核，但現在不一定患病；強陽性結果則常提示有活動性結核灶，應及時增加結核菌病原學檢查、影像學檢查、血沉等檢查等以便確診。

強陽性結果如下圖。

6.T-SPOT試驗

是一種簡化的酶聯免疫斑點(enzyme-linked immunospot，ELISPOT)試驗，結核感染患者體內長期存在抗原特異性的記憶性T細胞，當外周血T細胞再次遇到抗原刺激時，能迅速活化增殖，釋放γ干擾素，通過定量檢測γ干擾素的釋放水平，來診斷結核感染情況。

原理如下圖：

相比於PPD試驗來說，T-SPOT用於結核感染檢測具有更高的靈敏度和特異性。

對於菌陰、結核菌素試驗不能達到強陽性的疑似結核患者、免疫功能低下患者以及疑似肺外結核的患者，均可採用T-SPOT試驗輔助診斷或排除。

T-SPOT試驗陰性結果可以基本排除感染，陽性結果提示患者目前處於結核感染的狀態，但是不可區分潛伏感染或活動性感染。

陽性結果需要結合臨床，所以T-SPOT陰性結果具有更多的臨床意義。

—END—

隨著科學技術的發展，從傳統的病原學檢測到T-SPOT試驗，結核檢測方法的特異性和敏感性都有較大提高，但結核病的確診並不容易，除了上述檢驗方法，常還需要結合影像學結果及臨床表現綜合分析。

說明：本文為原創投稿，不代表國際檢驗醫學傳媒、檢驗醫學微信平台觀點。

轉載時請註明來源及原創作者姓名和單位。

編輯：冉敏 審校：陳雪禮

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