愛滋病檢測幫你消除恐艾

檢測方法

檢測HIV感染者體液中病毒抗原和抗體的方法，操作方便，易於普及應用，其中抗體檢測尤普通。

但HIv P24抗原和病毒基因的測定，在HIV感染檢測中的地位和重要性也日益受到重視。

抗體檢測

血清中HIV抗體是判斷HIV感染的間接指標。

根據其主要的適用範圍，可將現有HIV抗體檢測方法分為篩檢試驗和確證試驗。

確證試劑

篩檢實驗陽性血清的確證最常用的是Western blot（WB），由於該法相對窗口期較長，靈敏度稍差，而且成本高昂，因此只適合作為確證實驗。

隨著第三代和第四代HIV診斷試劑靈敏度的提高，WB已越來越滿足不了對其作為確證實驗的要求。

FDA批准的另一類篩檢確證試劑是-免疫螢光-試驗（IFA）。

IFA比WB的成本低，而且操作也相對簡單，整個過程在1-1.5小時內即可結束。

此法的主要缺點是需要昂貴的螢光檢測儀和有經驗的專業人員來觀察評判結果，而且實驗結果無法長期保存。

現在FDA推薦在向WB不能確定的供血員發布最終結果時以IFA的陰性或陽性為準，但不作為血液合格的標準。

篩檢試驗

篩檢試驗主要用於對供血員進行篩查，因此要求操作簡便，成本低廉，而且靈敏、特異。

2012年，世界上主要的篩檢方法仍然是ELISA，還有少數的顆粒凝集試劑和快速ELISA試劑。

ELISA有很高的靈敏度和特異性，操作簡單，僅需要實驗室配備酶標儀和洗板機即可應用，特別適合於試驗室大規模篩檢使用。

顆粒凝集實驗是另一種操作簡單方便，成本低廉的檢測方法，該方法結果可通過肉眼判定，靈敏度很高，特別適合發展中國家或大量篩選供血員時使用，缺點是必須使用新鮮樣品，特異性較差。

80年代後期發展起來的斑點印跡檢測（Dot-blot assay）是一種快速ELISA（Rapid ELISA）方法，這種方法操作極為簡便，過程短暫，整個過程多數在5-10分鐘內甚至3分鐘內即可結束，但該法比ELISA和顆粒凝集試劑昂貴得多。

人類免疫缺陷病毒抗體口腔粘膜滲出液檢測試劑盒（膠體金法）就屬於側向免疫層析法（金免疫）類別，基於免疫層析技術通過手工操作、肉眼讀取結果、20分鐘即可定性得出檢測結果的快速診斷試劑，用於檢測口腔粘膜滲出液樣本中的HIV-1型和HIV-2型抗體。

可用於自願諮詢檢測、不願採血、暈針患者的初篩。

該方法適用於初篩檢測，凡由該試劑測定為陽性者，需進行進一步篩查確認。

[3]

（HIV陰性）說明從人體內檢測不到HIV抗體，陰性符號以（-）表示。

不能說沒有感染HIV, 要看是什麼時候檢測的，在窗口期內，感染者的體內還沒有產生HIV抗體，或還沒有產生足量的HIV抗體，這時HIV檢測是陰性結果，如果在窗口期之後檢測的，可以排除感染HIV的可能。

（HIV陽性）說明從人體內檢測到了HIV抗體，陽性符號以（+）表示。

檢測結果不定因素

感染還處於窗口期：從HIV進入體內到檢測這段時間還不夠長，因此血清還沒有形成典型的抗體反應

愛滋病進展到終末期，抗體水平下降

其他非病毒蛋白抗體的交叉反應：自身免疫性疾病、某些惡性疾病、懷孕、輸血或器官移植等情況下，身體可以產生一些抗體，其反應與HIVP24核心蛋白抗體引起的反應很相似

抗原檢測

病原檢測主要指用病毒分離培養、電鏡形態觀察、病毒抗原檢測和基因測定等方法從宿主標本中直接檢測病毒或病毒基因。

由於前兩種方法難度大，且需要特殊設備和專業技術人員。

因此僅抗原檢測和RT-PCR(反轉錄－PCR)可用於臨床診斷。

HIV-1P24抗原檢測可用於HIV-1抗體不確定或窗口期的輔助診斷；HIV-1抗體陽性母親所生嬰兒早期的輔助鑑別診斷；第四代HIV-1抗原/抗體ELISA試劑檢測呈陽性，但HIV-1抗體確認陰性者的輔助診斷。

P24抗原檢測一般用ELISA雙抗體夾心法試劑，試劑必須經過SDA批准註冊、在有效期內，其陽性結果必須依據試劑說明書經中和試驗確認。

HIV-1P24抗原檢測的敏感性為30-90%，該結果僅作為HIV感染的輔助診斷依據，不能據此確診；HIV-1 P24抗原檢測陰性只表示在本試驗中無反應，不能排除HIV感染，臨床中一般不作為常規診斷項目。

核酸檢測

HIV核酸檢測可用於HIV感染的輔助診斷、病程監控、指導治療方案及療效判定、預測疾病進展等。

常用的HIV病毒載量檢測方法包括逆轉錄PCR實驗（RT-PCR）、核酸序列擴增實驗（NASBA）、分支DNA雜交實驗（bDNA）以及實時螢光定量PCR技術。

值得注意的是，每一種HIVRNA定量系統都有其最低檢測限，即可以測出的最低拷貝數或國際單位，RNA定量檢測時未測出不等於樣品中不含有病毒RNA，因此HIV核酸定性檢測陰性，只可報告本次實驗結果陰性，但不能排除HIV感染；HIV核酸檢測陽性，可作為診斷HIV感染的輔助指標，不能單獨用於HIV感染的診斷。

報告HIV核酸定量檢測結果時應按照儀器讀數報告結果，註明使用的實驗方法、樣品種類和樣品量，當測定結果小於最低檢測限時，應註明最低檢測限水平。

HIV核酸定性檢測也可用於HIV感染的輔助診斷，在分析HIV基因亞型和變異等基礎研究中應用。

通常使用PCR或RT-PCR技術，使用分子生物學實驗室通用的擴增試劑，引物可來自文獻或自行設計，應儘量覆蓋所有或常見的毒株，也可使用複合引物。

報告定性檢測結果時應註明反應條件和所使用的引物序列。

此外，利用核酸檢測方法的高度敏感性，使用集合核酸擴增檢測技術和方法，對高度懷疑感染人群且抗體陰性的樣品進行集合核酸檢測，可及時發現窗口期感染者。

該方法較單份樣品的核酸檢測具有更高的成本效益。