HIV檢測方法
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目前國際上HIV抗體常規篩查的主流試劑是以雙抗原夾心法為原理的第三代試劑,它與第1、2代HIV診斷試劑不同,可同時檢測所有類型抗體,提高了試劑的敏感性,同時特異性也得到了提高,且比第2代試劑對HIV感染的檢測平均提高5天。
第4代HIV診斷試劑是將HIV抗原和抗HlV-1 p24抗體同時包被載體,可同時檢測樣本中的HIV-1 p24抗原和Hlv抗體,因此該類試劑可以檢出HIV-1
p24抗原陽性但抗體還未陽轉的HIV感染的「窗口期」樣本,從理論上講,第四代試劑檢出Hlv感染的時間要早於第三代試劑。
國外有文獻報導第4代HIV試劑可進一步將「窗口期」縮短4~5天。
第一代試劑
使用HIV全病毒裂解物為抗原,應用間接法原理檢測HIV抗體。
如日本富士公司生產的HIV-PA試劑。
第二代試劑
使用在細菌或真菌中表達的人工重組或化學合成多肽HIV抗原,應用間接法原理檢測HIV抗體。
基因重組通常易於在培養基中生產大量同源性抗原,產品為單一目的基因而非多樣性抗原混合,特異性高於第一代試劑。
第三代試劑
使用合成多肽HIV抗原(少數用重組抗原),應用雙抗原(或雙抗體)夾心法原理檢測HIV抗體(或抗原)。
由於標記HIV抗原可同時檢測血清中HIV-1 IgG、IgM、 IgA抗體,此類試劑的敏感性和特異性均優於標記抗人免疫球蛋白的間接法。
第四代試劑
此類試劑在第三代試劑盒基礎上,將針對P24抗原的抗體與HIV-1抗原一起包被固相載體,可同時檢測HIV-1 IgG、IgM、IgA抗體和P24抗原。
檢測方法
A.醫療衛生部門常用的檢測方法:
1、
酶聯免疫吸附法(ELISA):通常用於初篩,便宜,大多採取血液檢測,也有使用唾液和尿液的,實際檢測通常需要三到四個小時,結果分為「陽性」或「陰性」。
其準確度高達99.5%,但敏感性高於特異性——這意味著在極少數檢測的結果是不準確的,而其中假陰性又是極其罕見的。
這又意味著:只要確實過了窗口期,而且操作正確,陰性的檢測結果是十分可信的。
由於ELISA的敏感性高於特異性,其他病原體的感染或者操作的不規範也會造成陽性的結果——稱為「假陽性」。
所以陽性的初篩結果需要用同樣的樣本進行重新檢測,或者用其他方法進行確診。
2、快速檢測法:對血液或口腔黏膜進行取樣,檢測HIV抗體,20-40分鐘即可得出跟ELISA一樣十分準確的結果。
在試劑可靠操作規範的情況下,其錯誤率僅為千分之一至千分之三。
(注意:不要因此以為唾液、接吻、共用餐具就可傳播HIV)。
跟ELISA一樣,快速檢測的結果如果呈陽性,也需要進行確診檢測。
3、免疫印跡法(Western Blot):只用於對初篩呈陽性的案例進行確診檢測,有三種結果,「陽性」,「陰性」和「不確定」。
「不確定「通常發生在受測者的身體剛剛對病毒產生免疫反應的時候。
在免疫印跡法的結果中,假陽性是極其罕見的。
4、間接螢光抗體試驗(IFA):也用於對初篩呈陽性的案例進行確診檢測,但不是很常見。
其方法是用顯微鏡來找到血液中的HIV抗體。
B.抗原檢測:抗原是入侵病原體攜帶的某種能激發人體產生抗體的物質。
HIV攜帶的抗原通常是P24蛋白。
在感染初期,它們在血液中的含量會急劇上升從而能被檢測到。
但HIV病毒在人體里安家落戶之後它又檢測不到了。
所以這種方法常跟抗體檢測一起用於捐獻血液的HIV檢測。
C.聚合酶鏈反應檢測(PCR):核酸擴增試驗指的是釋放基因物質並用聚合酶鏈反應檢測。
PCR用於直接檢測HIV的核酸物質,在感染兩至三周內就能從血液中檢測出HIV病毒。
這種方法還可以用於測試血液中的病毒含量,為治療提供依據。
但是它既昂貴又複雜。
這對檢測者來說意味著:
在試劑可靠、確定已過窗口期的情況下,初篩的陰性結果(ELISA和快速檢測法都算)是十分可靠的。
一次檢測就已足夠。
初篩的陽性結果需要通過確診檢測來排除假陽性,確診結果也是十分可靠的。
有條件的受測者可以選擇C、D兩種方式進行檢測,以求更準確,更及時地了解自身狀況,但這昂貴且不易獲得。
而且最終確診感染仍需通過抗體檢測。
來源:好大夫在線 韓呈武 轉載
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