日本英醫院生殖中心YingIVF試管治療患者指南(4):受精
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英醫院試管嬰兒治療全周期包括:1)首診、2)促排、3)取卵、4)授精、5)胚胎培育、6)PGD篩查、7)移植 七個步驟。
今天為大家介紹第四步,受精。
試管嬰兒中受精是在體外完成的,所以IVF在日本也稱為體外受精。
卵子受精後就成為具有生命力的受精卵,通過細胞的快速分裂,開始了胚胎髮育過程。
一、對取出的卵子進行形態觀測
卵子級別是剛剛取出卵子時從形態上觀測的結果,按卵母細胞的外圍顆粒膜細胞的豐富程度分為G1到G3。
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G1:最佳,卵母細胞外圍的顆粒膜細胞非常飽滿
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G2:其次,卵母細胞外圍的顆粒膜細胞較飽滿
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G3:較差,卵母細胞外圍的顆粒膜細胞稀疏,未成熟可能性高
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D:變異卵,不能使用
二、剝離顆粒膜細胞,判定卵子成熟度
培養的第一步,就是剝離卵子的外部顆粒膜細胞,留下卵母細胞。
根據卵母細胞的成熟度,即是否開始減數分裂排出第一極體,分為GV,MI,M2三種:
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GV卵:GV期的卵母細胞沒有恢復減數分裂,將顆粒膜細胞去掉後可以看到明顯的核。
自然排卵狀態下月經第八天卵子即開始長成到GV期。
GV卵在正常IVF培養中不能使用,只能用於四代試管胞漿置換等操作。 -
MI卵:M1期是第一次減數分裂中期的卵母細胞,沒有排出第一極體,顆粒細胞也擴散的不好。
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MII卵:M2期卵母細胞是第二次減數分裂中期的卵母細胞,已經排出第一極體。
只有M2卵屬於成熟卵,可以和精子結合,排出第二極體,成為受精卵。
第三步:選擇受精方式,進行受精操作
根據精子情況不同,我們採用體外受精(自然受精)、顯微受精(ICSI)和結合法。
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自然受精(一代試管):在日本稱為「體外受精」,在卵子周圍是精子濃度為10萬個/ml的媒精液,精子優勝劣汰自行進入卵子,完成精卵結合的過程。
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顯微受精(二代試管):在凍精或者鮮精精子狀況不好、曾經有過受精障礙、或者精液的觀察結果不明顯的情況下使用。
顯微受精或稱注射受精(ICSI, Intra-Cytoplasmic Sperm Injection),俗稱二代試管嬰兒技術,顯微鏡下觀察精子的活動情況,選擇最強壯健康的直接注射到卵子中,進行受精和孵化。 -
結合法是體外受精和顯微受精兩種方式的結合:把採集到的卵子,一部分進行自然受精,另一部分進行顯微受精,或者在自然受精失敗時,用顯微受精作為補救。
在簽署受精卵培養同意書時,患者可以選擇自己傾向的受精方式,或選擇由培養師決定。
第四步 受精卵分裂和培養
受精成功的標誌:受精過程約需24小時。
當一個精子進入卵母細胞的透明帶時,受精過程即開始。
到卵原核和精原核的染色體融合在一起時,能夠看到兩個原核(2PN)時,標誌著受精過程的順利完成。
隨後受精卵開始快速的倍數分裂,在受精第二天分裂為四細胞,第五天和第六天會繼續成長為囊胚。
幾種典型的培養失敗情況:
關於受精環節的常見問題:
Q:我今天取的卵都是G2,為什麼還是不受精呢?
A:卵子的級別G2是剛剛取出後從形態上觀測的結果,還沒有開始培養,還不能真正反應卵子的質量和生長能力。
從統計數據看,93%新取出的卵子都是G2,G2卵有75%的機率能被受精。
Q:什麼叫做「卵子不成熟,不能受精?」
A:剝離卵子外部顆粒膜細胞後,可以觀察到卵子的成熟度。
GV和M1都屬於卵子不成熟的情況。
GV卵不再使用,M1經過培養(即卵子前培養),還有機會長到M2。
只有達到M2級的卵,才具備了受精的能力。
因為試管嬰兒是採用超促排(即比自然狀態下多促一些卵),取出的卵平均有1/4是不成熟的,達不到受精要求。
Q:凍精好還是鮮精好呢?
A:因為精子冷凍技術已非常完善,凍精和鮮精的培養結果差別極小,我們一般建議兩者皆可以,有條件的情況下優先使用鮮精。
Q:自然受精好還是顯微受精好呢?
A:臨床統計看,自然受精比顯微受精的胚胎後期的流產率略低,但差別不明顯,所以根據精子的情況,我們會優先使用自然受精。
只有在使用凍精,或者鮮精精子狀況不好、曾經有過受精障礙、或者精液的觀察結果不明顯的情況下使用顯微受精。
Q:什麼叫做 「卵子受精後不分裂」 ?
A:在自然受精或顯微受精情況下,最健壯的精子會自行進入或被注射到卵子中。
正常情況下卵在受精後會開始裂變,首先分裂成兩個原核。
如果沒有開始分裂,只有物理注入,受精卵就沒有在繼續生長,這種叫「受精卵不分裂」。
Q:什麼叫做「受精卵異常分裂,單核或三核」 ?
A:正常卵子受精後,在分裂初期會形成兩個原核。
如果出現單核1PN或者三核3PN,都屬於分裂異常。
我們會記錄這個異常,但同時會繼續培養。
單核受精卵依然有3%的機率可正常發育為囊胚。
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