揭秘試管嬰兒的實驗室操作步驟(第一代試管)

2020-09-06

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華熙國際健康顧問為更好的幫助做試管嬰兒的家庭了解到試管嬰兒的實驗室是如何操作，具體步驟是什麼，通過對專業文獻資料的了解和對醫生的採訪了解，我們為您整理如下資料，僅供參考。

第一節實驗室治療

一、第一代試管嬰兒

第一代試管要兒就是將不孕不育症患者夫婦的卵子與精子取出體外，在體外培養系統中受精並發育成胚胎後，將胚胎移植入子宮腔內以實現妊娠的技術。

家驗室主要步驟如下：培養液配製和平衡(Day-1)一挑卵、洗卵、卵預培養（Dav0)二精液處理（Day0）一體外受精（Day0)一拆卵一觀察雌雄原核(Day1）一胚胎培養（Day2、3）一胚胎移植(Day3)一胚胎冷凍（Day3)→囊胚培養（Day4、5、6）→囊胚冷凍（Day5、6)-杯胎復甦（自然周期）.

（一）取卵前準備

培養液是卵細胞在體外發育成熟、受精和體外培養的主要環境，培養液儲存要求很嚴格，所有不含蛋白質的培養液在2~8℃條件下保存，如未開封可保存至有效期，開封使用，最多保存至開封后30天。

如果加入了HSA，HCO，緩衝系統的培養液在37℃5% CO2的培養箱中最多保存2天，在2~8℃條件下保存至1周，HCO3，緩衝的培養液在儲存前必須在5%~6%的CO，條件下平衡3~5min。

含培養液的試管和培養皿要記錄成分，製備日期。

取卵前一天配製卵泡沖洗培養液、卵子沖洗培養液（WM）、受精培養液（IM）、卵裂培養液（GM）、精子處理培養液、精子孵育培養液，置37℃、5%CO，培養箱中平衡4h以上。

取卵前一天，將礦物油放入CO，培養箱中過夜平衡，也要確保CO，培養箱處千37%；5%CO，和飽和濕度的環境。

密度梯度離心液臨用前30min置室溫臨用時現配。

取卵前1-2天實驗人員要認真閱讀患者病例，必要時與臨床醫生進行病例討論

（二)取卵和精液處理

（1）取卵前半小時開啟IVF操作箱和解剖顯微鏡熱台，設置溫度為37℃，將取卵用的所有試管和尋找卵子的平皿放入其中預熱；準備巴斯德(Pasteur)吸管，過火使其變圓滑；準備2根1ml胰島素注射器用來撥卵和拆顆粒細胞，取卵前將卵子沖洗皿放入IVF操作箱中，並在培養皿上和所有準備好的器材上用記號筆清楚標註患者的姓分和日冊（不要使用水筆)，並做口頭證實以確定患者姓名。

將恆溫試管架打開，將卵泡洗液放在恆溫試管架中預熱待用。

(2)取出的卵泡液全部倒入培養皿中，解剖顯微鏡鏡下尋找卵-冠-丘複合物（OCCC）。

取出的OCCC在卵子沖洗皿中沖洗，拆除部分顆粒細胞，儘可能的去除血細胞和其他碎片，之後移人受精培養皿中，置入37℃5%~6%C0；培養箱中培養4-6h（平均5h）後受精，應填寫實驗室登記表。

（3）一般女方取卵時男方即開始取精液標本。

實驗員收到精液標本後，認真核對患者夫婦姓名，精液記錄表內容要仔細填寫。

（三）體外受精、觀察雌雄原核和胚胎培養

確認患者姓名和日期後，取處理、調整密度後的精子溶液進行體外受精，受精後16~18h觀察受精情況，觀察後將受精卵移入卵裂培養液滴中，放入37℃5%-6%的CO2）培養箱中繼續培養。

取卵當天配製卵裂培養液（TM），取卵第2天配製移植培養液（TM）、囊胚培養液，置37℃、5%C02，培養箱中平衡12h以上。

（四)胚胎移植、囊胚培養和囊還冷凍

第3天觀察胚胎髮育情況，選擇優質胚胎在當日進行胚胎移植，在移植前應有兩個人校對培養皿上的名字和登記表上的名字，餘下的胚胎繼續培養至囊胚，第5、第6天進行胚胎冷凍。

請繼續關注第二代、第三代試管嬰兒實驗室操作步驟。

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2020-09-15

顯微鏡下的試管嬰兒，是怎樣「長大的」？

很多想要做試管嬰兒的患者，其實對整個實驗室操作部分不了解，今天小編就給大家普及一下，試管嬰兒實驗室的操作過程。

揭秘試管嬰兒的實驗室操作步驟(第一代試管)

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