精子洗滌的方法種種
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許多年輕夫婦還搞不清精液和精子的區別,他們很焦慮是不是性交以後的精液流出影響了受孕。
在醫生建議做宮腔內人工授精(IUI)治療的時候,對於精液的處理,大多不孕夫婦很茫然,為什麼精液要洗滌?注射到宮腔里和陰道里有不同嗎?
精子洗滌的方法種種
在每個生殖中心都有這樣一個部門和單元—— 人工授精治療區,它由取精室、精子處理室、人工授精室等功能單位構成。
這裡有非常嚴格的管理制度和工作流程。
丈夫們在醫生通知的時間,進入取精室採集精液,有一個小窗口遞進精子處理室,並核對指紋。
精液在處理室經過近兩個小時的操作,洗滌好的精子懸液被送進人工授精室,核對好姓名,注射進入妻子的子宮裡,渴望精卵能夠順利遇見彼此,成就一個新的生命。
為什麼要進行精子洗滌
1677年,荷蘭的顯微鏡學家列文虎克首次利用顯微鏡觀察到了精子,正常成年男性每克睪丸組織每秒內可產生約300~600個精子,每天雙側睪丸可產生幾千萬至上億個精子。
人類精子的發生需要經過一系列複雜的過程,其時程約為70天左右。
1929年《新英格蘭醫學雜誌》發表了關於精子計數可用於不育症診斷與判斷預後及治療的論文,開始了真正意義上的精液分析。
在男性射出的正常的精液中,精子占5%,精漿占95%,精漿是由附性腺的分泌液組成:其60%來源於精囊腺液,30%來源於攝護腺液,含液化因子、鋅、枸櫞酸和酸性磷酸酶等成分,少量來自尿道球腺液和附睪液等。
精子與精漿就像魚與水的關係。
在自然受孕時精漿有助於精子順利進入女性陰道,有助於精子穿透宮頸黏液,等精子進入子宮頸管後,精漿就流出體外。
在應用於宮腔內人工授精(IUI)或體外受精(IVF)等輔助生育技術都需要處理精液,去除精漿,規避了宮頸等自然屏障的阻擾。
因為精漿並不是無菌的,不能進入非常潔凈的女性子宮腔,而且精液中某些成分(如攝護腺素、鋅)可刺激子宮收縮,引起疼痛,所以我們要將精子從精液中分離出來,最終提純和製備出的精子懸液,含高比例的、形態正常的、活動力強的精子,且沒有碎片和其他細胞以及死精子,這樣的精子就可以用在宮腔內人工授精和體外受精中了。
ART方案不同,精子需量身定做
輔助生育技術中卵胞漿內單精子注射(ICSI)、體外受精(IVF) 、宮腔內人工受精(IUI)技術,對精子的數量和質量要求依治療方案不同而異。
(1)ICSI技術是將一個精子注入一枚卵細胞質內的顯微操作技術,對精子的數量要求最低,最低限度只要是有形態正常、活動的精子即可,屬於「一見鍾情」類,常應用於嚴重的少弱精症和受精障礙患者的治療方法;
(2)IVF治療方案中一枚卵子周圍需要3~5萬條精子擁簇才能正常受精,屬於「眾星拱月」類,常用於輸卵管因素不孕;
(3)IUI治療則需要至少一千萬以上前向活動的精子,它們浩浩蕩蕩從子宮腔出發,激流勇進,跋山涉水,最終冠軍精子在輸卵管處尋覓到卵子妹妹的芳容,攜手笑定終身,屬於「鵲橋相會」類。
實驗室精子洗滌方法種種
精液是分成數段射出的,富含精子的攝護腺液,位於射精過程的初始部分,後面則主要是精囊液。
所以精液標本採集是否完整、前次禁慾時間長短、附性腺分泌量、近期患病情況(尤其是發熱)、射精障礙、精神緊張等因素,都會對本次精液質量結果產生影響。
何種質量的精液標本,採用各種不同的精子洗滌方法,其產生的效果是不同的。
實驗室的精子製備方法目前常用的有以下幾種:簡單的洗滌、直接上游法和非連續密度梯度離心法,各種方法之間各有優缺點。
1.「簡單的洗滌法」
就是用培養液稀釋精液標本,直接離心,收集沉澱的精子團,該方法可回收最多的精子,但夾雜死精子和其他細胞碎片;
2.「直接上游法」
是根據精子的泳動能力選擇精子。
將培養液加到液化精液上方,也可以將精液加到培養液的下方,活動的精子會自動游泳到培養液里表面呼吸新鮮空氣,將聚集在培養液表層上方的優質精子收集備用;
3.「非連續密度梯度離心法」
將精液放置在不同密度梯度培養液的上方,在離心過程中由於密度不同而分離,常用上層40%和下層80%的密度梯度液,加上活動精子主動遊動,穿過梯度液在離心管底形成一個鬆軟的沉澱團,可獲得部分活力很好的精子,且不含碎片、白細胞、非精子細胞和退化的生精細胞。
三種方法中「非連續密度梯度離心法」在活動精子的回收率上明顯高於上游法,而且最終精子懸液中精漿成分污染也低於上游法。
可用攝護腺分泌的鋅作為可溶性的精漿成分標誌物,鋅從精漿向上層上游液的擴散呈時間依賴性,上游法製備的精子懸液中鋅的濃度比密度梯度法高。
在精子優化處理過程中,儘量選擇處理時間短,離心力低,操作輕柔,以減少對精子的損傷。
許多精子洗滌液已經商品化,產品很多種,結果也更穩定。
本文作者:張燕
副主任技師
江蘇省人民醫院生殖中心
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