實驗動物止痛、麻醉、術前與術後照顧通則SOP 編號B2-011
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(3) 由於大鼠與小鼠無發生術間或術後嘔吐的危險,故無須禁食。
但若是與消化道有關的 ... (7) 若於術前或術後須使用廣效性的注射型抗生素藥物,可選用下列其一:.
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實驗動物止痛、麻醉、術前與術後照顧通則SOP編號B2-011
國立嘉義大學實驗動物照護及使用委員會:B2生物農業科技館實驗動物舍
SOP編號:B2-011
核可日期:105年8月25日
頁次:1/2
實驗動物止痛、麻醉、術前與術後照顧通則 ★SOP編號B2-011 一、目的: 此規範的目的在確保術後的嚙齒類實驗動物得以順利恢復。
同時讓動物使用者可於疼痛發生時採取適當的措施。
二、適用範圍: 進行手術之實驗大鼠與小鼠。
三、程序: (一)嚙齒類實驗動物次要存活性手術: 1.所有器械應於手術前完成消毒。
2.手術操作區需以70%酒精或四級胺類消毒劑進行消毒。
3.動物必須沒有任何臨床症狀。
4.手術區域的毛髮應於術前剃除乾淨,同時應清潔皮膚,並以70%酒精或手術專用碘液進行消毒。
5.手術操作人員應穿戴無菌手套及手術口罩。
若連續進行多項手術,應於不同手術間更換手套。
(二)嚙齒類實驗動物主要存活性手術: 1.動物準備: (1)評估健康狀態。
建議動物應在手術前1-2週送達動物房,以讓動物有時間消除運送所造成的緊迫。
(2)動物必須沒有任何臨床症狀。
(3)由於大鼠與小鼠無發生術間或術後嘔吐的危險,故無須禁食。
但若是與消化道有關的手術,禁食幾個小時方可進行手術。
2.術前準備: (1)進行嚙齒類實驗動物手術時不一定需要獨立的空間,但至少應為一個整齊的,且不是很多人往來經過的區域,以利無菌操作進行。
(2)手術桌面與器械必須徹底消毒。
(3)手術操作人員應使用適當的麻醉以確實阻斷疼痛反射。
動物必須秤重已估算正確的麻醉用量。
例如: →以50-100mg/kgketamine+5-15mg/kgxylazine的劑量進行腹腔注射,麻醉時間少於30分鐘。
如果必 須延長手術時間,可追加給予原劑量的1/10至1/3。
→氣體麻醉如isoflurane需要有適當的抽風排除系統,以確保研究人員的安全。
→Sodiumpentobarbital以30-40mg/kg的劑量進行腹腔注射。
→Avertin(2.5gm2,2,2Tribromoethanol、5mlamylenehydrate[2-methyl-2-butanol,tertiaryamylalcohol];200ml蒸餾水-pH中性),藥物劑量以250mg/kgB.W.腹腔注射給藥 (4)麻醉期間,應維持動物正常體溫。
大鼠與小鼠有較高的體表面積,因此散熱較快。
手術期間動物發生死亡的主要原因,常為體溫過低所致,不在麻醉或手術本身。
建議可使用循環式溫水毯或保溫燈以保持動物體溫。
(5)剃除手術區域周圍的毛髮,以避免毛髮造成污染。
剃除過大範圍的毛髮會降低動物體溫調節的能力,應避免。
(6)手術區域的消毒至少有2個步驟。
建議先以70%酒精擦拭,接著以碘液塗佈於手術區域皮膚表面。
避免將動物的全身皮膚都弄濕,否則可能造成動物體溫過低、甚至死亡。
(7)術間建議塗抹無菌眼藥膏於動物雙眼,以避免手術過程中角膜乾燥受損。
(8)執行手術的人員應於術前用抗菌劑刷手。
術者與相關助手,均應穿戴無菌手套與口罩,並務必穿著乾淨的實驗衣或刷手服。
3.手術: (1)術間動物應維持在適合手術的麻醉狀態,並隨時監控麻醉深度,例如可定期觀察呼吸、黏膜顏色、及捏動物腳趾反射。
(2)手術過程中所有用到的器械及材料均應滅菌。
(3)為了避免創口及手術器械受到污染,應在動物體表覆蓋創巾。
創巾應覆蓋動物的所有暴露區域,包括尾巴及四肢。
(4)每10分鐘監控與評估動物的生命表徵。
(5)選擇適用的方法與材料縫合創口。
用於皮膚的縫線應使用無毛細現象、且為不可吸收性的材質,以降低術後感染的風險。
4.術後照顧: (1)將動物移到溫暖、乾燥的場所,並持續觀察動物恢復時的生命表徵(例如呼吸與黏膜顏色)。
(2)可由皮下提供輸液(乳酸林格氏液40-80ml/kg/24hr),並提供保暖以利術後動物的恢復,也可在鼠籠內放置微濕的飼料。
(3)將術後觀察的結果記錄於術後觀察記錄表。
手術記錄表與術後觀察記錄表可自行設計,但內容至少應包括:IACUCNo.、手術日期、動物體重、麻醉劑使用、止痛劑使用、動物呼吸、活動力、傷口之觀察。
(4)依據實驗計畫書投予止痛藥,並記錄於術後觀察記錄表。
建議術前投與止痛劑。
大小鼠疼痛評估與常用止痛藥如附件。
(5)在動物完全由麻醉狀態恢復後,才可以將動物送回原飼育房舍。
該動物的鼠籠應明顯標示,以利獸醫師在術後2天內追蹤動物的健康狀況。
(6)術後3天內,應至少每天檢查一次動物,檢查的項目包括縫合的創口紅腫的狀況,或是創口有無分泌物,動物的飲食、泌尿、排便狀況等。
(7)若於術前或術後須使用廣效性的注射型抗生素藥物,可選用下列其一: →Baytril(enrofloxacin)用於大鼠的劑量是以肌肉注射或皮下注射,每日兩次給予2.5-5mg/kg。
→Cephalexin用於大鼠的劑量是以皮下注射,每日兩次給予15mg/kg。
→Trimethoprim/sulfadiazine用於大鼠的劑量是以皮下注射給予0.5ml/kg,240mg/ml(即120mg/kg)。
(8)術後10-14天,拆除皮膚的縫線或皮釘。
(9)當發現術後併發症(如感染或恢復期拖長),應立即與獸醫師聯繫。
四、參考資料: (一)國研院國家實驗動物中心http://www.nlac.org.tw/n7/n7-2-1.asp (二)實驗動物管理與使用指南第三版(擴充版) http://animal.coa.gov.tw/html/index_04_3_1.html
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