精液品質檢查與精液生產操作規程
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一、本操作規程的目的:
1、 規範公豬站精液品質檢查與精液生產的各項操作;
2、 減少次品精液的發生率;
3、 確保人工授精所用的精液都是合格的。
二、精液品質檢查
檢查項目與要求:整個檢查過程要迅速、準確,一般在5~10分鐘內完成,以免時間過長影響精子的活力。
精液質量檢查的主要指標有:射精量、顏色、氣味、精子密度、精子活力、精子畸形率等。
1、精液量
後備公豬的射精量一般為150~200毫升,成年公豬為200~600毫升,稱重量算體積,1克計為1毫升。
2、顏色
正常精液的顏色為乳白色或灰白色。
如果精液顏色有異常,則說明精液不純或公豬有生殖道病變,凡發現顏色有異常的精液,均應棄去不用。
3、氣味
正常的公豬精液具有其特有的微腥味,無腐敗惡臭氣味。
有特殊臭味的精液一般混有尿液或其它異物,一旦發現,不應留用。
並檢查采精時是否有失誤,以便下次糾正做法。
4、密度
指每毫升精液中含有的精子數,它是用來確定精液稀釋倍數的重要依據。
正常公豬的精子密度為2.0~3.0億/毫升,有的高達5.0億個精子/毫升。
檢查精子密度的方法常用以下兩種:
(1)精子密度儀測量法:極為方便,檢查時間短,準確率較高。
該法有一缺點,就是會將精液中的異物按精子來計算,應予以重視。
(2)紅細胞計數法:該法最準確,但速度慢,其具體操作步驟為:
用不同的微量取樣器分別取具有代表性的原精100微升和3%的KCl溶液900微升,混勻。
在計數板的計數室上放一蓋玻片,取少量上述混合精液放入計數板槽中。
在高倍顯微鏡下計數5個中方格內精子的總數,將該數乘以50萬即得原精液的精子密度。
5、精子活力
檢查精子活力前必須使用37℃左右的保溫板預熱:一般先將載玻片放在38℃保溫板上預熱2至3分鐘,再滴上1小滴精液,蓋上蓋玻片,然後在顯微鏡下進行觀察。
精子活力一般採用10級制,即在顯微鏡下觀察一個視野內作直線運動的精子數,若有90%的精子呈直線運動則其活力為0.9;有80%呈直線運動,則活力為0.8;依次類推。
新鮮精液的精子活力以高於0.7為正常,稀釋後的精液;當活力低於0.6時,則棄去不用。
6、畸形精子率
畸形精子包括巨型、短小、斷尾、斷頭、頂體脫落、有原生質滴、大頭、雙頭、雙尾、折尾等精子。
它們一般不能作直線運動,受精能力差,但不影響精子的密度。
公豬的畸形精子率檢查一般採用紅細胞計數法,詳見上述,要求檢查精子總數200以上。
三、精液稀釋
稀釋精液必須在恆溫環境中進行,處理時,嚴禁太陽光直射精液,陽光對精子有極強的殺傷力。
稀釋液應在采精前準備好,並預熱好。
精液採集後要儘快稀釋,未經精液品質檢查或活力在0.7以下的精液不用於稀釋。
1、稀釋頭份的確定
人工授精的正常劑量一般為40億個精子/頭份,體積為80ml。
假如有一份公豬的原精液,密度為2億/ml,采精量為150ml,稀釋後密度要求為40億/80ml頭份。
則此公豬精液可稀釋150×2/40=7.5頭份,需加稀釋液量為80×7.5-150=450ml。
2、精液稀釋步驟
1) 測量精液和稀釋液的溫度,調節稀釋液的溫度與精液一致(兩者相差1℃以內)。
注意:必須以精液的溫度為標準來調節稀釋液的溫度,不可逆操作。
2) 將精液移至2000ml大塑料杯中,稀釋液沿杯壁緩緩加入精液中,輕輕攪勻或搖勻。
3) 高倍稀釋要先進行1:1低倍稀釋,1分鐘後再將餘下的稀釋液緩慢加入。
因精子需要一個適應過程,不能將稀釋液直接倒入精液。
4) 精液稀釋的每一步操作均要檢查活力,稀釋後要求靜置片刻再作活力檢查。
活力下降必須查明原因並加以改進。
5) 用具的洗滌:精液稀釋的成敗,與所用儀器的清潔衛生有很大關係。
所有使用過的燒杯、玻璃棒及溫度計,都要及時用蒸餾水洗滌,並進行高溫消毒,以保證稀釋後的精液能如期保存和利用。
6) 精液的分裝:稀釋好的精液,檢查其活力,前後一致便可以進行分裝。
四、精液的分裝
1、以前沒使用過的精液瓶,應先檢查其對精子的毒害作用如何。
使用的瓶子必須為對精子無毒害作用的塑料製品。
2、稀釋好精液後,先檢查精子的活力,活力無明顯下降則可進行分裝。
3、按每頭份80ml進行分裝。
如果精液需要運輸,在用瓶子分裝時,應排掉瓶子裡的空氣,以減少運輸中震盪對精子的應激。
4、分裝後的精液,將精液瓶加蓋密封,貼上標籤,清楚標明公豬站號、公豬品種、采精日期及精液編號。
五、精液的保存
1、 需保存的精液應先在22℃左右室溫下放置1~2小時後放入17℃(變動範圍16~18℃)冰箱中,或用幾層干毛巾包好直接放在17℃冰箱中。
2、 冰箱中必須放有靈敏溫度計,隨時檢查其溫度。
分裝精液放入冰箱時,不同品種精液應分開放置,以免拿錯精液。
精液應平放,可疊放。
3、 查看:從放入冰箱開始,每隔12小時,要小心搖勻精液一次(上下顛倒),防止精子沉澱聚集造成精子死亡。
一般可在早上上班、下午下班時各搖勻一次,並做好搖勻時間和人員的記錄。
4、 冰箱應一直處於通電狀態,儘量減少冰箱門的開關次數,防止頻繁升降溫對精子的打擊。
5、 保存過程中,一定要隨時觀察冰箱內溫度的變化,出現溫度異常或停電,必須普查貯存精液的品質。
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