有没有生物医学方面做小白鼠灌流实验的高手？ - kylelong的日志

2，活体灌注固定实验（perfusion-fixed experiment）：就是在麻醉的动物活体时通过心脏将4％的多聚甲醛（PFA）固定液灌流到全身。

（1）小鼠麻醉后， ... 下载APP | 繁體版 | 发布广告 |常用工具 搜索 登录 注册 找回密码 切换风格 搜索关键词 搜索 我要发布 首页Portal 新闻 专题 贝壳村 博客Blog 热贴 论坛Forums 视频 微博Doing 旅游 居家 购物美国打折网 同城美国同城网 发布日志 发布微博 论坛发贴 发起投票 发布分享 上传图片 分类博客 全部分类热点杂谈 政经军事 法律相关 文史杂谈 网络文摘 流水日记 家庭新闻 子女教育 房前屋后 私房小菜 我的车车 花鸟鱼宠 健康生活 两性话题 爱情婚姻 留学生活 移民生活 职场内外 财经理财 活动报道 回国记录 摄影街拍 旅游归来 原创文学 诗词书画 前尘往事 英文分享 博你一笑 大话影视 音乐欣赏 自吟自唱 娱乐八卦 体育随笔 请求帮助 村内互动 自我介绍 信仰见证 社团信息 其它日志 博客导航 最新发表 我关注的 热门日志 好友日志 编辑推荐 我的日志 贝壳村口 我的收藏 倍可亲首页› 日志› kylelong› 日志 +好友 发送消息 kylelong (已有24,797,902人访问过博主空间) https://www.backchina.com/u/250647 空间首页 日志 主题 相册 记录 分享 留言板 有没有生物医学方面做小白鼠灌流实验的高手？ 作者：kylelong  于 2011-10-706:02 发表于 最热闹的华人社交网络--贝壳村 作者分类:科普知识|通用分类:请求帮助|已有13评论        最近，想做小白鼠灌流实验，自己经验不多，希望高手指点。

以下信息来自网络，看看有没有问题。

先谢谢了。

  1，离体心脏灌注实验（langendorffexperiment）：在摘取麻醉的动物活体心脏之后用固定液灌流心脏。

  （1）需要足够细的主动脉插管，可以购买灌流针，也可以利用200ul的枪头自己烧制，最好能使尖端带有凹槽以利于系线固定（枪头有凹槽），头皮针太滑、太尖。

（2）足够快的解剖操作，准确地将主动脉灌流针（或自制插管）插到主动脉（aorta，artery）根部，而不刺破主动脉瓣（aorticvaives）。

（3）减少插管前心脏的代谢，但是用冰水容易使主动脉回缩。

（4）灌流针从左心间插入，一般深度到达左动脉弓（aorticarch，arterialarcades）为宜，此时隐约能明显看到针尖在动脉弓的位置。

（5）为了方便固定，可以用小号止血钳夹住进针的位置，打开灌流器（蠕动泵之类），调节流速（这个值一般靠经验），开始灌注。

           2，活体灌注固定实验（perfusion-fixedexperiment）：就是在麻醉的动物活体时通过心脏将4％的多聚甲醛（PFA）固定液灌流到全身。

  （1）小鼠麻醉后，用大头针固定四肢在泡沫板上。

灌流器要事先准备好。

（2）剪开胸腔暴露心脏，用20ml注射器（尖端用血管钳弄钝，避免刺破心脏或主动脉）从心尖（apex）插入至升主动脉（ascendingaorta，发自左心室，位于肺动脉干与上腔静脉之间，向右前上方至右侧第2胸肋关节后方移行为主动脉弓，升主动脉根部发出左、右冠状动脉），用血管钳固定针尖，也可以用镊子固定针头。

注意：针头不要扎得太深，进入左心室就可以了，不用非得进入主动脉，太深的话，扎破了室间隔进入肺循环后，肺就很快白了。

（3）用生理盐水（normalsaline，用于两栖类动物时是0.67～0.70％，用于哺乳类动物和人体时是0.85～0.9％，人们平常点滴用的氯化钠注射液浓度是0.9％）或者pbs快速先冲洗， （4）待小鼠快变成“气球小鼠”之前（其实很快，也就打开灌流器之后30秒不到），可以观察灌流器工作阻力明显增加，剪刀剪开右心包（也有剪右心耳的），让灌流液流出。

（5）期间会观察到的现象：四肢抽搐，鼠尾先翘起后僵直，肝脏颜色变浅，鼠口鼻中有白色泡沫涌出，肠道颜色稍有变化，但不是很明显。

（6）用4％多聚甲醛缓慢冲洗灌注（也可以用注射器，但必须是技术相当熟练）。

判断灌注效果好不好的标志是：鼠尾僵直；肝脏变成浅色，有的人直接描述为发白。

（6）灌流只是临时固定，以便取较脆弱的组织（如脊髓和脑组织），取出来后的组织放到取材体积20倍的多聚甲醛溶液中固定。

（7）决定灌注质量的额外因素：小鼠麻醉剂量要合适，不能让它麻醉过量；剪开胸腔前做好灌注准备，剪开之后立即操作。

（8）中心原则：一定要在灌流液进入之前，保证老鼠存活，血液循环畅通。

（9）如果要保留完好心脏，则可以绕过左心尖，直接从主动脉弓进针，可以直接将主动脉弓截断，伤口进针，下口止血钳封闭，灌注差不多时，就不用剪开右心包，直接打开下口。

（10）注射器灌注，由于压力不好控制，容易导致小血管破裂，片子形态不好。

（11）盐水一般30－50ml，PFA一般50mL左右，在换液时不要移动针头。

     3，活体麻醉问题         （1）1％戊巴比妥钠，80mg/kg效果很好。

    （2）腹腔注射（IP）麻醉，药物由腹腔粘膜吸收；如果误打进了肠腔或膀胱就会导致效果不理想。

     （3）保证注入腹腔的办法：拇指和食指捏住小鼠头部皮肤，小鼠背靠手掌，将尾巴固定在小指和无名指缝中，此时小鼠牢固被固定在左手中。

     （4）看到小鼠的髂骨上缘了吗？1mL的注射器沿髂骨上缘（大概是大腿前沿）水平进针，针尖的开口要向上（向外）；水平，是指沿小鼠的左右。

进针后稍微摇动针尖，这样即使针尖进入了肠腔，一摇自然就出来了。

然后控制好量缓缓注射。

      （5）2％的戊巴比妥纳效果也很好，剂量45mg/kg体重腹腔注射，约十分钟达到最佳的麻醉状态。

     （6）其它麻醉方法：氯胺酮（8mg/100g）；10％水合氯醛，3ml/kg；用麻醉机吸入麻醉剂（异氟醚）。

  （收集编辑）     [10/06]加拿大与中国有那些相同或相似之处？ [10/06]上网一定要学学这个：颈椎病自我康复操 [10/06]上帝是否“随缘”？ [10/06]人生哲理99条（第二辑）（13）：怀旧是珍惜生命和情感的体现 [10/07]高跟鞋的艺术 [10/07]有没有生物医学方面做小白鼠灌流实验的高手？ [10/07]睡莲、睡菜、睡草 [10/07]回国探亲带点什么东西给亲朋好友？ [10/07]中国的阴暗面离我们有多近？（四）：言论不自由 [10/08]周末小菜：木耳番茄鸡（养颜祛斑佳肴） [10/09]不管好人坏人，只要信基督就能上天堂，不信就要下地狱？ [10/09]朋友们要卡拉OK，谁能提供比较流行的英文歌曲？ [10/09]10·10－－感恩节快乐！ 查看：[kylelong的.最新博文] 查看：[大家的.最新博文] 查看：[大家的.请求帮助] 高兴 感动 1 同情 搞笑 1 难过 拍砖 1 支持 1 鲜花 刚表态过的朋友(4人) 秋天的云 水影儿 fuji VANO 收藏 分享邀请 举报 发表评论 评论(13个评论) 1 回复 fuji 2011-10-706:14 你学医的？我看了就分不清东北。

2 回复 白露为霜 2011-10-706:15 小白鼠真可怜。

2 回复 柳絮闻雁 2011-10-706:23 有视频就好了。

2 回复 ManCreatedGod 2011-10-706:26 白露为霜:小白鼠真可怜。

小白鼠的死真正地为拯救人做出了贡献。

并不像耶稣上十字架那种口头的拯救 2 回复 RNSandi 2011-10-707:20    2 回复 在美一方 2011-10-707:25 你是在问问题吗？没看出来啊。

2是我实验室的常规，1是多年前做过，都是做大鼠，小鼠更容易。

个人认为这样具体的描述某些细节对圈外人士非常的disturbing，需要交流应该私下进行或者在专业论坛讨论。

2 回复 kylelong 2011-10-708:35 在美一方:你是在问问题吗？没看出来啊。

2是我实验室的常规，1是多年前做过，都是做大鼠，小鼠更容易。

个人认为这样具体的描述某些细节对圈外人士非常的disturbing，需要...吸取各方智慧 2 回复 在美一方 2011-10-708:46 kylelong:吸取各方智慧你们动物中心对这些信息没有规范吗？我们是有的，连照个照片都需要在protocol里面批准的。

而这里不少网友想看我实验鼠的照片，碍于规范，我从来没满足过谁的要求。

你说是贴这个文是吸取各方的智慧，而且题目里也有个问号，可我并没有看见你问问题，而是详细描述在外人看来很残酷的技术细节。

如果冒犯了，请原谅，我不得不说你这篇文章发在公共场合，不是我理解的professional. 不必回了，我不会继续讨论，尽管你这些步骤里面有些是比较tricky而我是相当有经验的。

1 回复 山之西东 2011-10-709:24 你来问这样的问题，是否有点overqualify? 2 回复 水影儿 2011-10-710:51 对小白鼠们，我做过的最高难操作是从眼球取血。

现在想起来直做噩梦。

2 回复 kylelong 2011-10-711:18 水影儿:对小白鼠们，我做过的最高难操作是从眼球取血。

现在想起来直做噩梦。

的确。

腿部采血好一些。

2 回复 genhunter 2011-10-2112:18 Areyougoingtodowholebodyperfusion&fixationorjustforanyparticularorgan,suchasliver? 2 回复 kylelong 2011-10-2200:46 genhunter:Areyougoingtodowholebodyperfusion&fixationorjustforanyparticularorgan,suchasliver?liverandbrain.Thanks. 涂鸦板 您需要登录后才可以评论登录|注册 评论 kylelong最受欢迎的博文 中国和欧美床上用品的标准尺寸对比[2013/07] 猪肉各部位的食用方法[2010/05] 加拿大人的收入税比对表[2014/02] 胸口疼的原因分析与处理意见[2014/11] 什么原因会导致心跳加快？[2013/05] 加拿大海洋三省自驾游全攻略[2011/08] 北美市场6种品牌的“骨胶原”对比[2014/04] 鲫鱼、鲗鱼、鲷鱼的区别[2010/05] 北美常见水产品中英文对照及吃法（网络更正版）[2009/08] TB皮试阳性的判断及处理[2011/11] 海外华人回中国，用什么证件最好？[2013/11] 洋葱的青苗能当葱吃吗？[2011/07] 网络情缘的4大障碍[2010/03] 中国人说英语为什么听起来没有礼貌？[2010/12] 膝盖疼的原因及处理[2016/03] 世界各地的粽子集锦[2019/06] 为什么很多人对基督教比较反感？[2010/10] 为什么海外华人回国要装穷？[2010/09] 对“异议”与“民运”人士的心理剖析[2011/01] 贝壳村“中秋圆月摄影有奖大赛”[2009/09] 国籍与爱国[2009/06] 贝壳村发展史[2010/09] 我的人生历程：0岁－40岁（图片集）[2009/03] 贝壳村村旗（草案）[2011/01] 2012贝壳村“多伦多夏令营”活动报道[2012/07] 贝壳村集体大合影（和谐版）[2010/06] 今天我请客[2010/08] 2080年贝壳村村民上海大聚会[2012/05] 祝妈妈咪生日快乐！[2010/03] 博客：最新推荐>>More lancasor假如谷爱凌被拐卖肯定不会落到八孩女的惨ruoyun1969一言难尽的汉人海外特色大国做坏事的国人qxw66由八孩事件想到的老习应该下个罪己诏了瀑川1966年的清华我和同学开始了第二次串联谢盛友让一部分人先信仰起来是正确的方向好的选kyotosizumoto徐州丰县董志民家族的前世今生及其关系网successful事出反常必有妖我们要求彻查丰县铁链女yunmu浅谈高血压白大衣和蒙面高血压及治疗标准矫海涛中国国民法海外民间版草案双重国籍当可行8288FBI警告新型手机诈骗造成的损失飙升 热点新闻>>更多北京冬奥闭幕德语媒体说:"终于结束了"陆媒：用谷爱凌的标准鸡娃你们也太自作多情了清零还是共存中国团队研究「第三条」抗疫路线大肆挥霍：美国“报复性消费潮”终于来了印尼踩雷！中国承建的高铁超支近700亿他猛呛中国：别再寄信给我了！这显得你多可笑香港疫情超武汉单日再突破6千例本土女子发现5年前买的麦当劳汉堡竟跟刚买时一样儿半夜上网不睡觉爸爸怒开讯号干扰器下场惨了!美企业变相涨价花招百出 >>更多 其它[请求帮助]博文更多 kylelong：中国人民币汇率改革与人民币贬值 天天天兰：对前阶段求助的事情给大家个交代 xoyuanfen：分类的纠结 九畹：我该怎么办？ fuji：怎么回事呵？ goodoctor：能给俺“一次幸福的机会”吗？ opa900：准备跳海了。

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