好書推薦:《實時螢光定量PCR(第二版)》

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實時螢光定量PCR

(第二版)

主編:李金明

頁數:512頁

定價:118元

裝幀:圓脊精裝

ISBN: 9787030498274

科學出版社

《實時螢光PCR技術(第二版)》幾乎是市場上唯一一本近幾年出版的、系統地講述螢光定量PCR技術臨床應用的書籍。

臨床檢驗中的實時螢光定量PCR和基礎科研有著不同之處,通常是應用一種成熟的方法、技術,往往是一個商品試劑盒,去檢測患者標本,要求每一份標本的檢測都要是及時和準確的。

PCR的臨床應用必須圍繞怎樣防止假陽性和假陰性結果的出現而採取相應的質量保證措施,本書有助於您解決實時螢光PCR檢驗中的各種問題,是指導PCR檢驗工作的必備參考書籍。

內容簡介

本書系統闡述了實時螢光PCR技術的基礎理論和臨床檢測方法,包括臨床PCR技術的發展歷史及趨勢,實時螢光PCR技術的基本原理和方法,臨床PCR實驗室的設計及質量管理體系的建立,臨床PCR檢驗標本的採集、運送、保存及核酸提取,實時螢光PCR測定的數據處理,實時螢光PCR儀及其發展,臨床PCR檢驗儀器設備的使用、維護和校準,臨床PCR檢驗的質量保證,病毒核酸檢測的標準物質及其應用,以及各型肝炎病毒、人免疫缺陷病毒G1、人乳頭瘤病毒、巨細胞病毒、嚴重急性呼吸綜合徵冠狀病毒、EB病毒、流感病毒、風疹病毒、麻疹病毒、手足口病病原體、伊波拉病毒、中東呼吸綜合徵冠狀病毒、沙眼衣原體、結核桿菌、淋病奈瑟菌、幽門螺桿菌、肺炎支原體、剛地弓形蟲、解脲支原體等實時螢光PCR檢測及臨床意義、EGFR基因、KRAS基因、BRAF基因、PIK3CA基因等實時螢光PCR檢測及臨床意義。

作者簡介

李金明

醫學博士,國家衛生計生委(原衛生部)臨床檢驗中心副主任,兼臨床免疫室主任,研究員,中國醫學科學院北京協和醫學院和北京大學醫學部博士研究生導師。

2006年獲國務院政府特殊津貼,獲2009-2010年度國家衛生部「有突出貢獻中青年專家」稱號。

自20世紀90年代中期以來,在國內較為系統地提出了臨床分子診斷實驗室質量管理、檢測質量保證及標準化的概念和方法,推動了全國臨床基因擴增檢驗實驗室及人員培訓的規範化,率先在國內開展臨床核酸檢驗的質量控制和標準化工作,於2005年和2006年分別獲得了我國第一個病毒核酸檢驗國家二級和一級標準物質。

研究方向為臨床分子診斷方法及標準化。

以項目負責人先後承擔國家自然科學基金課題5項,「863」課題1項,傳染病重大專項課題1項,首都醫學發展科研基金課題2項。

以分課題負責人參與國家及國際合作研究課題10多項。

在學術期刊上以第一作者和通訊作者發表論文160多篇,其中SCI論文90餘篇。

個人編著出版了《臨床酶免疫測定技術》(人民軍醫出版社,2005),主編《臨床基因擴增檢驗技術》(人民衛生出版社,2002,共同主編)、《全國臨床檢驗操作規程》(第3版)(東南大學出版社,2006,臨床基因和核酸檢驗篇主編)、《個體化醫療中的臨床分子診斷》(人民衛生出版社,2013)、《臨床免疫學檢驗技術》(全國高等院校本科教材,人民衛生出版社,2015)、《全國臨床檢驗操作規程》(第4版)(人民衛生出版社,2015,臨床免疫檢驗共同主編),參編其他專著和教材十餘部。

所主持和主參的項目分獲北京市科技進步二等獎1次,三等獎2次。

書訊

聚合酶鏈反應(polymerasechainreaction,PCR)技術自1983年問世以來,因為其對基因或特定核酸序列在短時間內的極大的擴增效率,已在感染性疾病、腫瘤、遺傳病、寄生蟲病、法醫學、動植物和考古等的診斷和研究中得到了廣泛的應用,並在某些方面幾乎是難以替代。

PCR用於疾病的臨床診斷,使人們擁有了從對蛋白分子的表型的認識進一步深入到了遺傳物質——核酸分子的探索的有力工具,也使臨床檢驗診斷學科中的臨床分子診斷這一分支得到了飛速發展。

但像任何一件自然界的事物一樣,PCR有其無可比擬的優點,但也有因其優點而來的一定的弱點,如果在臨床實際應用中,不遵循一定的規則,也很容易造成並非PCR技術本身問題所致的錯誤的檢驗結果。

因為臨床檢驗跟科研不一樣,科研實驗可以在500次實驗中,即使是出現499次失敗,只要第500次成功了,該項科研就是成功的,研究者就可以因此發表一篇極有影響力的論文,提出一個嶄新的假說,甚至獲得諾貝爾獎。

而臨床檢驗,則是應用一種成熟的方法、成熟的技術,通常是一個商品試劑盒,去檢測患者的臨床標本,要求每一次臨床檢測,乃至對每一份標本的檢測都要是準確和及時的。

要做到這一點,就必須要有嚴格的質量保證程序。

臨床PCR檢驗相對於其他臨床檢驗技術,因其極高的檢測靈敏度,影響因素很多。

如標本或核酸純化過程中出現的擴增反應抑制物、擴增儀孔間溫度的差異,以及核酸提取中的隨機誤差,可造成假陰性結果的出現。

又如,以前擴增產物的污染和核酸提取中標本間的交叉污染,也很容易出現假陽性結果。

因此,PCR臨床應用必須圍繞怎樣防止假陽性和假陰性結果的出現而採取相應的質量保證措施。

近10年來,實時螢光PCR技術因為其檢測快速、靈敏,以及不易出現產物污染,作為準確的核酸定量檢測方法自不必說,也是很好的核酸和基因突變定性檢測方法,因此其臨床應用越來越廣,從病原體的核酸定量檢測、基因分型,擴展到腫瘤基因突變、遺傳病等人的基因檢測,而且,基於螢光共振能量轉移原理的實時螢光PCR技術,其有多種多樣的探針及引物的設計模式來實現靶標的精準檢測。

PCR方法在臨床分子診斷中已展現了巨大的應用價值,但臨床實驗室必須在充分了解PCR測定的不確定性的基礎上,採取相應質控措施,才能確保實驗結果的準確性,而不致出現重大判斷失誤。

因為PCR擴增,其得到極大的檢測靈敏度,但同時其對檢測中的錯誤也有極大的放大作用。

因此,對於PCR檢測結果的報告必須慎重,尤其是在該結果會產生重大後果的時候,如重大感染性疾病、遺傳病、法醫物證鑑定、親子鑑定等,必須在有相應嚴格質控措施如內質控、陰性和陽性質控的情況下重複測定,才可以報告結果並做出實事求是的解釋。

為了全國在臨床PCR檢驗第一線工作的工作者能夠更好的掌握實時螢光PCR技術,小編推薦李金明教授的大作《實時螢光PCR技術(第2版)》。

《實時螢光PCR技術(第2版)》主要針對在國內外臨床實驗室最具使用前景及目前使用最廣泛的實時螢光PCR技術,從PCR技術的歷史、發展和趨勢,實時螢光PCR技術的特點,臨床PCR實驗室的設計及質量管理體系的建立,用於PCR檢驗的臨床標本的採集運送和保存,臨床PCR實驗室的儀器設備的使用、維護和校準,臨床PCR檢驗的數據處理和質量保證,以及主要臨床PCR檢驗項目的特點、臨床意義及注意細節等進行了論述,以期為從事臨床PCR檢驗的實驗室技術人員提供參考性建議。

當然,從事科研的實驗室技術人員也可從《實時螢光PCR技術(第2版)》得到相應的啟發,因為一個成功的科研與實驗過程中的質控(科研中通常稱為對照)是分不開的,尤其是科研中要用到PCR方法的,有大量的證據表明,如果沒有嚴格的質量控制,科學研究人員就會將在實驗室中所得到「假陽性」或「假陰性」結果,當作一個重大發現去發表,從而造成難以挽回的後果。

有些涉及仲裁、具有重大影響的檢測的部門,則會因為「假陽性」或「假陰性」結果,對國家、部門和公民個人造成嚴重的損失,最嚴重的甚至會影響社會穩定。

《實時螢光PCR技術》第一版印刷16次,銷售21000冊;第二版印刷4次,銷量已超過6000冊。

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編輯推薦

為適應新的發展需要,第2版在第1版的基礎上,對原有的一些章節內容進行了更新,同時增加了手足口、麻疹、風疹、登革熱、伊波拉、MERS 等病毒核酸檢測, 以及EGFR、KRAS、BRAF、PIK3CA 基因突變檢測等章。

參編專家

目錄

第1章 臨床PCR技術的發展歷史及趨勢

第2章 實時螢光PCR技術的基本原理和方法

第3章 臨床PCR實驗室的設計及質量管理體系的建立

第4章 臨床PCR檢驗標本的採集、運送、保存及核酸提取

第5章 實時螢光PCR測定的數據處理

第6章 實時螢光PCR儀及其發展

第7章 臨床PCR檢驗儀器設備的使用、維護和校準

第8章 臨床PCR檢驗的質量保證

第9章 病毒核酸檢測的標準物質及其應用

第10章 A型肝炎病毒實時螢光PCR檢測及臨床意義

第11章 B型肝炎病毒實時熒

第12章 C型肝炎病毒實時螢光RT-PCR檢測及臨床意義

第13章 人免疫缺陷病毒-1實時螢光RT-PCR檢測及臨床意義

第14章 人乳頭瘤病毒實時螢光PCR檢測及臨床意義

第15章 巨細胞病毒實時螢光PCR檢測及臨床意義

第16章 嚴重急性呼吸綜合徵冠狀病毒實時螢光RT-PCR檢測及臨床意義

第17章 EB病毒實時螢光PCR檢測及臨床意義

第18章 流感病毒實時螢光RT-PCR檢測及臨床意義

第19章 風疹病毒實時螢光RT-PCR檢測及臨床意義

第20章 麻疹病毒實時螢光RT-PCR檢測及臨床意義

第21章 手足口病病原體實時螢光RT-PCR檢測及臨床意義

第22章 伊波拉病毒實時螢光定量RT-PCR檢測及臨床意義

第23章 中東呼吸綜合徵冠狀病毒實時螢光RT-PCR檢測及臨床意義

第24章 沙眼衣原體實時螢光PCR檢測及臨床意義

第25章 結核桿菌實時螢光PCR檢測及臨床意義

第26章 淋病奈瑟菌實時螢光PCR檢測及臨床意義

第27章 幽門螺桿菌實時螢光PCR檢測及臨床意義

第28章 肺炎支原體實時螢光PCR檢測及臨床意義

第29章 剛地弓形蟲實時螢光PCR檢測及臨床意義

第30章 解脲支原體實時螢光PCR檢測及臨床意義

第31章 EGFR基因實時螢光PCR檢測及臨床意義

第32章 KRAS基因實時螢光PCR檢測及臨床意義

第33章 BRAF基因突變的實時螢光PCR檢測及臨床意義

第34章 PIK3CA基因突變實時螢光PCR檢測及臨床意義

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