羊的人工授精技術及操作要點

人工授精技術包括器械的消毒、采精、精液品質檢查、精液的稀釋、保存和運輸、母羊發情鑑定和輸精等主要技術環節。

1 消毒技術

1.1 器械的消毒

采精、輸精及與精液接觸的所有器械都要消毒，並保持清潔、乾燥，存放在清潔的櫃內或烘乾箱中備用。

假陰道要用2%的碳酸氫鈉溶液清洗，再用清水沖洗數次，然後用75%的酒精消毒，使用前用生理鹽水沖洗。

集精瓶、輸精器、玻璃棒和存放稀釋液及生理鹽水的玻璃器皿洗凈後要經過30分鐘的蒸氣消毒，使用前用生理鹽水沖洗數次。

金屬製品如開膣器、鑷子、盤子等，用2%的碳酸氫鈉溶液清洗，再用清水沖洗數次，擦乾後用75%的酒精或進行酒精燈火焰消毒。

1.2 場地的消毒

準備一間向陽、乾淨的配種無菌室，要求地面平整，光線充足，面積為10～12平方米，室溫為18℃～25℃。

也可選擇寬敞、平坦、清潔、安靜的室外場所。

日常消毒用1%新潔爾滅或1%高錳酸鉀溶液進行噴洒消毒，每日於采精前和采精後各進行1次。

每星期對采精室進行1次熏蒸消毒，所用藥品是40%的甲醛溶液500毫升，高錳酸鉀250克。

1.3 羊體的消毒

公羊實施配種前和情期母羊實施配種前，用1%新潔爾滅溶液對羊體進行反覆消毒。

1.4 消毒應注意的問題

嚴格遵守消毒時間和消毒藥品的配量要求;熏蒸消毒時，應關閉門窗，第2天應提前1小時到崗，敞開門窗;注意安全，防止物品損壞，每次消毒完畢，應及時關掉電源。

2 采精技術

2.1 采精前的準備

2.1.1 器械的準備：所有的器械都要提前清洗、乾燥、消毒，存放於消毒櫃內備用。

2.1.2 公羊的準備：種公羊第一次采精時的年齡應在1.5歲左右，不宜過肥，也不宜過瘦，初次參加采精的公羊，應先進行采精訓練，方法是讓其"觀摩"其他公羊配種;或用發情母羊的尿液或分泌物塗抹在公羊鼻尖上，刺激性慾。

采精調教訓練成功後，才能進行正式操作。

2.1.3 假陰道的安裝：安裝假陰道時，先將內胎裝入假陰道外殼，再裝上集精瓶，注意內胎平整，不要出現皺褶。

為保證假陰道有一定的潤滑度，用清潔玻璃棒蘸少許滅菌凡士林，均勻塗抹在假陰道內胎和前三分之一處。

為使假陰道溫度接近母羊溫度，從假陰道注水孔注入少量溫水，使水約占內外胎空間的70%，假陰道溫度在采精時應保持在40℃～42℃。

注水後，再通過氣體活塞吹入氣體，使假陰道保持一定彈性，吹入氣體的量一般以內胎表面呈三角形合攏而不向外鼓出為適宜。

2.2 采精

采精前用溫水洗種公羊陰莖的包皮，並擦乾淨。

將台羊保定後，引公羊到台羊處，采精時采精員站立在公羊的右側，當種公羊爬跨時，迅速上前，右手持假陰道靠在母羊臀部，其角度與母羊的陰道的位置相一致（與地面成35～45度角），用左手輕托陰莖包皮，迅速將陰莖導入假陰道中。

羊的射精速度很快，當發現公羊有向前沖的動作時即已射精，要迅速把裝有集精瓶的一端向下傾斜，並豎起集精瓶，送精液到處理室，放氣後取下集精瓶，蓋好蓋，並記錄公羊號，放於操作台上進行精液品質檢查。

2.3 采精頻率

成年種公羊每日采精1～2次，連採3天休息1次，初采羊可酌減。

2.4 采精注意事項

嚴格遵守消毒技術要求，所有采精物品未經消毒不得應用。

采精訓練是一項細緻的工作，必須由采精熟練人員負責進行。

所用采精器的環境條件必須嚴格把握，溫度要控制在40℃～42℃。

3 精液品質檢查

精液品質檢查的目的是為了評定精液品質的優劣，以便決定它能不能用於輸精配種，同時，也為確定精液的稀釋倍數提供科學依據。

3.1 外觀檢查

3.1.1 顏色：正常的精液為濃厚的乳白色，肉眼可看到乳白色雲霧狀。

3.1.2 氣味：正常精液無味或略帶腥味。

3.1.3 精液量：公羊一次采精的精液量一般為0.5～2.0毫升，山羊平均為0.8～1.0毫升，綿羊平均為1.0～1.2毫升。

經外觀檢查，凡帶有腐敗臭味，出現紅色、褐色、綠色的精液判為劣質精液，應棄掉不用，一般情況下不再做顯微鏡檢查。

3.2 顯微鏡檢查

3.2.1 精子活率：精子的活率是指在38℃的室溫下直線前進的精子占總精子數的百分率。

檢查時以滅菌玻璃棒蘸取1滴精液，放在載玻片上加蓋玻片，在400～600倍顯微鏡下觀察。

全部精子都做直線運動評為1級，90%的精子做直線前進運動為0.9級，以下以此類推。

3.2.2 精子的密度：是指每毫升精液中所含的精子數。

取1滴新鮮精液在顯微鏡下觀察，根據視野內精子多少分為密、中、稀三級。

"密"是指在視野中精子的數量多，精子之間的距離小於1個精子的長度;"中"是指精子之間的距離大約等於1個精子的長度;"稀"為精子之間的距離大於1個精子的長度。

為了精確計算精子的密度，可用血球計數器在顯微鏡下進行測定和計算，每毫升精液中含精子25億以上者為密，20億～25億個為中，20億以下為稀。

3.3 精子質量的評定標準

精液為乳白色，無味或略帶腥味，精子活力在0.6以上，密度在中等以上（每毫升精液的精子數在20億以上），畸性精子率不超過20%，該羊精液判為優質精液。

以上幾項質量標準任何一項達不到要求，均被定為劣質精液。

3.4 精液檢查時應注意的問題

做顯微鏡檢查時，溫檢箱內溫度控制在38℃左右。

精液品質檢查要求迅速準確，室內要清潔，室溫保持在18℃～25℃。

精子的形態檢查，一般1周內對同1頭公羊精液做1次染色檢查，其他時間可根據經驗做直觀估測。

4 精液的稀釋、分裝、運輸和保存

4.1 精液的稀釋

精液稀釋的目的是擴大精液量，增加每次采精的可配母羊數，提高種公羊的利用率，還可供給精子營養，增強精子活力，有利於精液的保存、運輸和輸精。

4.1.1 稀釋液的配製：稀釋液的配方選擇易於抑制精子活動，減少能量消耗，延長精子壽命的弱酸性稀釋液。

配方一：生理鹽水稀釋液：是用注射用生理鹽水或經過過濾消毒的0.9%氯化鈉溶液作稀釋液。

此種稀釋液簡單易行，稀釋後的精液應在短時間內使用，是目前生產實踐中最為常用的稀釋液。

但用這種稀釋液稀釋時，稀釋的倍數不宜太高，一般以2倍以下為宜。

配方二：奶汁稀釋液：奶汁先用7層紗布過濾後，再煮沸消毒10～15分鐘，降至室溫，去掉表面脂肪即可。

這種稀釋液稀釋效果好，但稀釋倍數不能太高，以3倍以下為宜。

配方三：葡萄糖卵黃稀釋液：在100毫升蒸餾水中加葡萄糖3克、檸檬酸鈉1.4克，溶解後過濾3～4次，蒸煮30分鐘後滅菌，降至室溫，再加新鮮卵黃（不要混入蛋白）20毫升，再加青黴素10萬單位振蕩溶解。

這種稀釋液有增加營養的作用，可作7倍以下的稀釋。

4.1.2 精液的稀釋倍數：要根據精子密度、活力而定稀釋比例，稀釋後的精液，每毫升有效精子數不少於7億個。

4.1.3 精液稀釋的操作步驟：根據鏡檢得出精子密度確定稀釋倍數，根據稀釋倍數計算出應加入的稀釋液的量，用量杯量取應加的稀釋液量。

稀釋前將兩種液體置於同一溫水中，然後將稀釋液沿著精液瓶緩緩倒入，為使混合均勻可稍加搖動或反覆倒動1～2次，稀釋完畢後，立即進行活力鏡檢，並將鏡檢結果填人采精登記表。

4.1.4 精液稀釋應注意的事項：稀釋液溫度與精液溫度保持一致，在20℃～25℃室溫和無菌條件下操作，精液稀釋的倍數應根據精子密度而定，一般為1～3倍，稀釋後的每毫升有效精子數不能低於7億個。

4.2 精液的分裝

將稀釋好的精液根據各輸精點的需要量分別裝於2～5毫升小試管中，精液面距試管口不少於0.5～1.0毫升，然後用玻璃紙和膠圈將試管口紮好，在室溫下自然降溫。

分裝後貼上標籤，標籤上註明精液采出的日期、時間、活力、密度、公羊的品種。

4.3 精液的運輸

在近距離運送精液時，不必進行降溫，將裝有精液的集精瓶或小試管口封嚴，用棉花包好放入保溫瓶中即可。

遠距離運輸時，可用直接降溫法降溫。

運輸精液時要防止劇烈震動，降溫或升溫都要緩慢進行，每次輸送的精液都要註明公羊號、采精時間、精液量和精液品質。

4.4 精液的保存

4.4.1 常溫保存：精液稀釋後，保存在20℃以下的室溫環境中。

在這種條件下，精子運動明顯減弱，可在一定限度內延長精子存活時間。

常溫保存只能保存1天。

4.4.2 低溫保存：在常溫保存的基礎上，溫度進一步緩慢降至0℃～5℃之間。

可用直接降溫法，將精液裝入小試管內，外麵包以棉花，再裝入塑料袋內，直接放入裝有冰塊的廣口保溫瓶或保溫箱中，使溫度逐漸降至2℃～4℃。

低溫下保存的有效時間為2～3天。

4.4.3 冷凍保存：精液的冷凍保存要求的技術、環境和設備條件較嚴格，操作過程也比較複雜，這裡不加詳述。

5 發情鑑定

適時配種是提高羊人工授精受胎率的關鍵措施之一，母羊發情的主要表現：食慾減退、興奮不安、嘶鳴、爬跨其他羊或接受其他羊爬跨而靜立不動;陰門紅腫，頻頻排尿而流出透明的黏液;用試情公羊與母羊接觸（隔著試情架），母羊表現溫馴，並將後軀轉向公羊，陰門腫脹;用陰道開膣器插入陰道，使之開張，發情盛期的母羊陰道潮紅、潤滑，子宮頸口開張，分泌的黏液呈豆花樣。

6 輸精

6.1 輸精前的準備

6.1.1 人員的準備：輸精人員應穿工作服，用肥皂水洗手擦乾，用75%酒精消毒後，再用生理鹽水沖洗。

6.1.2 輸精器械的準備：把洗滌好的開膣器、輸精槍、鑷子用紗布包好，一起用高壓鍋蒸汽消毒。

6.1.3 母羊的準備：對發情母羊進行鑑定及健康檢查後，才能輸精，母羊輸精前，應對外陰部進行清洗，以1/3000新潔爾滅溶液或酒精棉球進行擦拭消毒，待乾燥後再用生理鹽水棉球擦拭。

6.1.4 精液的準備：將精液置於35℃的溫水中升溫5～10分鐘後，輕輕搖勻，做顯微鏡檢查，達不到輸精要求的不能用於配種。

6.2 輸精方法

將用生理鹽水濕潤後的開膣器插入陰道深部觸及子宮頸後，稍向後拉，以使子宮頸處於正常位置之後輕輕轉動開膣器90度，打開開膣器，開張度在不影響觀察子宮的情況下開張的愈小愈好（2厘米），否則易引起母羊努責，不僅不易找到子宮頸，而且不利於深部輸精。

輸精槍應慢慢插入到子宮頸內0.5～1.0厘米處，插入到位後應縮小開膣器開張度，並向外拉出1/3，然後將精液緩緩注入。

輸精完畢後，讓羊保持原姿勢片刻，放開母羊，原地站立5～10分鐘，再將羊趕走。

6.3 輸精次數和輸精量

輸精次數：母羊1個情期應輸精2次，發現發情時輸精1次，間隔8～10個小時應進行第2次輸精。

輸精量：每頭份的輸精量，原精液為0.05～0.10毫升，稀釋後精液應為0.1～0.2毫升。

6.4 輸精時應注意的問題

輸精人員要嚴格遵守操作規程，輸精員輸精時應切記做到深部、慢插、輕注、稍停。

對個別陰道狹窄的青年母羊，開膣器無法充分打開，很難找到子宮頸口，可採用陰道內輸精，但輸精量需增加1倍。

輸精後立即做好母羊配種記錄。

每輸完一隻羊要對輸精器、開膣器及時清洗消毒後才能重複使用，有條件的建議用一次性器具。

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